生化試劑的校準與結果溯源性

酶的校正要滿足在同一方法學、同一測定條件、與理論計算的FACTOR值差異不大，沒有發現有明顯影響因素，方可進行校正。檢驗結果溯源性，得建立一個可靠的參考系統作為準確性基礎，然后將準確性轉移到常規方法測定中去，使常規方法測定結果可溯源到參考系統所提供的準確性基礎上來。在實現溯源性目標過程中，永遠以患者新鮮標本為實驗對象，以方法學對比試驗方法為驗證手段。方法學對比試驗常采用回歸方程進行統計分析，假如斜率接近1，截距較小，這意味著實驗室常規方法對標本測定結果和溯源目標參考系統對標本...

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如何進行細胞周期的測定

一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間.從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期.細胞周期反應了細胞增殖速度.單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期.測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法,細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測定細胞周期的方法.BrdU（5-溴脫氧尿嘧啶核苷）加入培養基后,可做為細胞DNA復制的原料,經過兩個細胞周期后,細胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上應表現為...

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抗體按理化性質和生物學功能分類

抗體按理化性質和生物學功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。1、IgM抗體是免疫應答中首先分泌的抗體。它們在與抗原結合后啟動補體的級聯反應。它們還把入侵者相互連接起來，聚成一堆便于巨噬細胞的吞噬;2、IgG抗體激活補體，中和多種毒素。IgG持續的時間長，是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進入初乳，使新生兒得到保護;3、IgA抗體進入身體的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到...

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細胞凍存和復蘇原則及程序

一、凍存和復蘇的原則：慢凍快融當細胞冷到零度以下，可以產生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，并在細胞內形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內不致產生大的冰晶；相反結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。二、標準程序當溫度在-25℃以上時，1～2℃/min當溫度達-25℃以下時，5～10℃/min，當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中三、簡易程序將凍存管（管口要朝上）放入紗布袋內，紗...

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ELISA操作之標本的采取和保存、保溫

一、標本的采取和保存大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，HRP為標記的ELISA測定中，以溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG聚合，使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需－20℃保存。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均...

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單克隆抗體的應用　

單克隆抗體問世以來，由于其*的特征已迅速應用于醫學很多領域。主要表現在以下幾個方面。1．檢驗醫學診斷試劑作為檢驗醫學實驗室的診斷試劑，單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優點，廣泛應用于酶聯免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術。并且單克隆抗體的應用，很大程度上促進了商品化試劑盒的發展。目前，應用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應用于：①病原微生物抗原、抗體的檢測；②腫瘤抗原的檢測；③免疫細胞及其亞群的的檢測；④激素測定；⑤細胞因子的測定。單克隆抗體對抗...

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玻璃儀器清洗規程

1、試管、燒杯、漏斗等玻璃儀器如無特殊要求，用洗衣粉刷洗內壁，自來水沖凈后，純凈水潤洗三次，以內壁不掛水珠為準，自然晾干。有效期為七日，過期后使用時重新洗滌。2、液相色譜、氣相色譜使用的進樣瓶洗滌方法和原則與滴定管相同。3、效價用雙碟用完后，先浸入來蘇水中24h，取出超聲20分鐘，自來水逐個沖凈，純凈水潤洗后，以碟上不掛水珠為準自然晾干，裝入桶內。160℃干烤2小時滅菌備用。有效期為七日，過期后使用時重新160℃干烤2小時即可。4、微生物限度測定用三角瓶、刻度吸管、試管、雙碟...

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抗體的基因重排

抗體的L鏈是由C、V、J三個基因簇編碼的，H鏈由C、V、D、J四個基因簇編碼的。是編碼可變區，300個種類；編碼高變區,有15～20個種類；編碼連接V、V有DJC的結合區，4～5個種類；編碼恒定區，有C僅有一種。這些外顯子通過多種多樣的重排，所合成出的肽鏈，還要再進一步進行L和H鏈組合，這樣zui后生成的抗體種類就非常多了。抗體基因重排是發生在淋巴細胞分化的時候。按理化性質和生物學功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。1、IgM抗體是免疫應答中首先分泌的...

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