人絲裂原激活蛋白激酶P38試劑盒
人絲裂原激活蛋白激酶P38試劑盒(Human Mitogen-Activated Protein Kinase P38 Kit,P38 MAPK Kit),是基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測(cè)試劑盒,可特異性檢測(cè)人血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞培養(yǎng)上清中人絲裂原激活蛋白激酶P38(Mitogen-Activated Protein Kinase P38,P38 MAPK)的含量,經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測(cè)試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn),無交叉反應(yīng),檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,無試劑降解、雜菌污染等問題。P38 MAPK是絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)家族核心成員,主要參與細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡及分化的調(diào)控,其異常激活與炎癥性疾病、腫瘤、神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病密切相關(guān),是評(píng)估細(xì)胞應(yīng)激狀態(tài)、相關(guān)疾病輔助診斷、病情監(jiān)測(cè)及抗炎/抗腫瘤藥物篩選的重要指標(biāo)。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測(cè)快速,可精準(zhǔn)定量樣本中P38 MAPK含量,廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)、分子生物學(xué)科研、抗炎/抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞應(yīng)激機(jī)制研究等領(lǐng)域,是臨床、科研領(lǐng)域的核心信號(hào)通路相關(guān)檢測(cè)工具。
檢測(cè)原理
本試劑盒的核心檢測(cè)原理,基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),聚焦人絲裂原激活蛋白激酶P38(P38 MAPK)的抗原抗體特異性結(jié)合特性,結(jié)合信號(hào)通路相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì):試劑盒預(yù)先將P38 MAPK特異性抗體包被于酶標(biāo)板上,加入待檢測(cè)樣本(血清、血漿等)后,樣本中的P38 MAPK會(huì)與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物;洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、細(xì)胞碎片、其他MAPK家族成員及無關(guān)蛋白后,加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的P38 MAPK二抗,與復(fù)合物特異性結(jié)合,形成“包被抗體-P38 MAPK-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu);再加入底物液(TMB),HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中P38 MAPK的含量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中P38 MAPK的具體含量。檢測(cè)流程規(guī)范:樣本采集后需及時(shí)處理(血清/血漿離心分離、細(xì)胞上清收集、組織勻漿破碎離心),按照試劑盒說明書稀釋樣本;酶標(biāo)板平衡至室溫后,依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對(duì)照,37℃孵育30分鐘;洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應(yīng),10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值,計(jì)算檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品特點(diǎn)
本產(chǎn)品針對(duì)人絲裂原激活蛋白激酶P38(P38 MAPK)檢測(cè)需求優(yōu)化制備,核心特點(diǎn)如下:1. 特異性強(qiáng):采用高特異性P38 MAPK單克隆抗體,可特異性結(jié)合樣本中的P38 MAPK,不與ERK、JNK等其他MAPK家族成員、雜蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),檢測(cè)特異性>99%,確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn),有效規(guī)避信號(hào)通路檢測(cè)中的干擾因素;2. 質(zhì)控嚴(yán)格:每批次試劑盒均通過靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測(cè),附完整QC報(bào)告,確保批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<8%、批間變異系數(shù)(CV)<10%,檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.1ng/mL,符合臨床檢測(cè)與科研標(biāo)準(zhǔn);3. 操作便捷:試劑盒含全套檢測(cè)試劑(包被酶標(biāo)板、P38 MAPK標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟簡(jiǎn)單,全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成,適配常規(guī)實(shí)驗(yàn)室操作,新手易上手;4. 樣本兼容廣:可適配人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿四種核心樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無需復(fù)雜預(yù)處理,僅需簡(jiǎn)單離心、稀釋即可檢測(cè),適配炎癥、腫瘤等相關(guān)科研與臨床多場(chǎng)景樣本;5. 適配場(chǎng)景廣:可用于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病等炎癥性疾病的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè),肺癌、肝癌等腫瘤的病情評(píng)估,細(xì)胞應(yīng)激與炎癥信號(hào)通路機(jī)制研究,抗炎、抗腫瘤、抗應(yīng)激藥物篩選,以及臨床檢驗(yàn)、分子生物學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)科研實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。
適用樣本類型
本試劑盒適配人源樣本的體外檢測(cè)與科研實(shí)驗(yàn),適用樣本類型明確:人血清樣本(靜脈采血后離心分離,避免溶血,溶血會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果)、人血漿樣本(EDTA或肝素抗凝,離心分離)、人細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本(腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、肝細(xì)胞對(duì)數(shù)期上清,離心去除雜質(zhì))、人組織勻漿樣本(腫瘤組織、肝組織、心肌組織、炎癥組織等破碎后離心取上清);實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景涵蓋類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病等炎癥性疾病的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè),肺癌、肝癌等腫瘤的病情評(píng)估,細(xì)胞應(yīng)激與P38 MAPK信號(hào)通路調(diào)控機(jī)制研究,抗炎、抗腫瘤、抗應(yīng)激藥物篩選與效果評(píng)估,以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。推薦檢測(cè)體系:使用試劑盒配套酶標(biāo)板,酶標(biāo)儀(波長450nm),按照說明書步驟操作;樣本稀釋比例為1:10(組織勻漿可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整),標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區(qū)間為0.2~1.3ng/mL(具體以說明書為準(zhǔn))。(具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說明書)
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存,嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失;2. 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開封后,密封冷藏保存,1個(gè)月內(nèi)用完,P38 MAPK標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融,防止其激酶結(jié)構(gòu)破壞,底物液需避光保存;3. 樣本采集后及時(shí)處理,血清/血漿冷藏24小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),細(xì)胞上清、組織勻漿冷藏或-20℃短期保存,48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),避免樣本變質(zhì)、P38 MAPK降解;4. 操作時(shí)嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范,佩戴防護(hù)用品,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜;檢測(cè)過程中控制孵育溫度與時(shí)間,洗滌充分,避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差;5. 底物液具有潛在刺激性,終止液為酸性溶液,操作時(shí)需謹(jǐn)慎,避免接觸衣物與皮膚,檢測(cè)完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板;6. 細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本需在細(xì)胞對(duì)數(shù)期采集,離心去除細(xì)胞碎片后再進(jìn)行檢測(cè),避免細(xì)胞雜質(zhì)干擾檢測(cè)結(jié)果。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請(qǐng)已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。