更新時間：2012-08-27
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一、用品
1、5%胰蛋白酶
2、含10%~20%血清培養液
3、DMSO或無色新鮮甘油（15磅蒸汽高壓消毒）
4、吸管、離心管、凍存管
二、操作步驟
1、從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存，但是對數生長期的細胞，已將長滿的細胞凍存后生存率低。在凍存前一天換一次培養液。
2、用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來，懸浮生生長的細胞則不需要處理。依據傳代方法把消化好的細胞收集于離心管并計數，離心。
3、去除胰蛋白酶及舊的培養液，加入配好的凍存培養液（含10%的DMSO或甘油），凍存液中細胞的zui終密度為5*10^6/mL~1*10^7/mL。用吸管輕輕地吹打使細胞均勻，然后分裝入無菌凍存管中。
4、裝完細胞后的凍存管即可直接凍存。
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